固相萃取仪在检测食品中三聚氰胺检测中的应用
发布时间：2021-01-28 15:39:53 点击次数：299
三聚氰胺是关键的氮杂环有机化工原料。它的水溶液是弱碱性的，可溶于甲醇，乙酸等，微溶于水和乙醇，不溶于C4H10O，苯等，并且在c-18色谱柱上的传统保留时间较差。为此，人们一般而言用到离子对试剂液相色谱法和lc/ms进行检测。但是，由于食品基质的复杂性，样品处理至关举足轻重。我们采用三种酸提取法固相萃取小柱纯化，辅以通过固相萃取仪操作，成立一套迅速，可靠和可重现的样品处理方式。
主要仪器和试剂
高效液相色谱仪，装备四个yuan梯度泵，在线真空脱气机，自动进样器，柱温箱，二极管阵列检测器，固相萃取仪，超声波清洗器，离心机，固相萃取小柱：OASISMCX，6ml，500mg。三聚氰胺标准化产品，纯度99％。
样品处理
提取：压碎并混杂后，精确称取5.0g样品，加入50醋酸1％trichloromL溶液和2ml2％乙酸铅溶液，充分混合并用超声波提取30分钟，然后在高温下离心加快并取出上清液，以备稍后纯化。
纯化方法：将固相萃取小柱（6ml，500mg）放在固相萃取仪样品架上，加5mlSPE 柱，5ml水进行活化，然后精确吸取5.0ml离心液到色谱柱上。将样品架移至顶部，并通过调节面板旋钮调节n2气流以控制流速不超过1ml/min。然后用5ml水和5ml甲醇洗涤洗脱液，弃去洗脱液用氮吹仪，将小柱升至顶部，调节空气阀旋钮以自动加压并干燥小柱，用5ml的5％氨甲醇溶液洗脱，搜集甲醇吹干，用甲醇-水（2：8，v/v）稀释至1.0ml，通过0.45μm的滤膜，并在机械上进行测量。
样品提取与纯化
三氯醋酸有着沉淀乳及其产品蛋白质的功用，并有助于三聚氰胺的分解。由于三聚氰胺是弱碱性的阳离子（弱阳离子化合物），因此通过阳离子交换柱进行纯化可达到除去杂质的功效，从而提高了检测灵敏度，重现性和回收率。
固相萃取仪的申请
固相萃取仪高效简便，可通过装置中的气流调节阀控制小柱的流速，并可直接吹干小柱，以确保每个小柱在活化和洗脱过程中均兼具不错的重现性可以与不同标准的固相萃取小柱（例如1ml，3ml，6mL等）一同用到，一次可以同时处理48个样品。我们添加了（2.0〜50.0）ug/mL和在奶粉中加入其他不同浓度的三聚氰胺，并进行了加标回收率和重现性实验。回收率在95％到99％之间。相对标准偏差低于3％。
结论
固相萃取仪的加压操作是通过在固相萃取小柱之上强加一定的空气压力或n2来实现的。
这样可以加速过滤速度，控制整个色谱柱活化，洗脱和洗脱过程的流速，使溶液可以轻松进入固定相孔隙，有利样品液和固定相之间的紧密触及，克服了常规手动操作时间，无法确保平稳流量，不同人员操作结果错误大的疑问，并通过简便的控制扫除了人为操作的偏差，确保在短时间内同时处理数十个样品，并具不错的结果可重复性。
