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细胞培养基的常见成分及功能介绍

发布时间:2021-01-21 11:04:18 点击次数:2125

介绍细胞培养基的常见组成和功能!

中国微生物菌种查询网:开展过哺乳动物细胞培养的任何人都明白典型的细胞培养基配方:将1瓶DMEM,10%的血清和一些其他成分混杂在一起以培养细胞以维系其生存能力。这些成分的功能是什么?

1.能源

每种生长培养基都需细胞代谢的碳源,碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖,例如半乳糖,己糖,果糖或其他碳源(例如丙酮酸,谷氨酰胺)。通常以5.5mM的最后浓度添加葡萄糖,这大概相等人体血液中的葡萄糖水准,但是您可以购买兼具多种葡萄糖浓度的培养基来满足您的特定需要。甚至可以购买不含葡萄糖的培养基,然后自定义浓度以模拟高糖糖尿病情况或研究低糖应激反应。

2.缓冲液

细胞需从7.2到7.4的特别pH值,否则它们将无法很好地发挥细胞功能以推动生长和存活。在二氧化碳含量高的培养箱中,二氧化碳与水反应生成氢离子,从而使细胞酸化。为了中和二氧化碳产生的酸度并在培养基中保持jiapH值,大多数培养基使用化学缓冲系统,但是某些缓冲方式会干扰细胞生长。

哺乳动物细胞changjian的缓冲系统是碳酸氢钠,有着很小的生物学影响。碳酸氢钠与氢离子反应生成二氧化碳,将其隔绝以保持pH值。但是,碳酸氢钠的一个弱点是要避免pH值对生理jia的缓冲功用,请注意,为避免此疑问,研究人员时常使用替代方式(例如HEPES)来增加某些传媒类别的缓冲能力。

三,酚红

由于维系pH值对于细胞培养至关最主要,因此许多培养基配方都涵盖酚红指示剂pH,它在酸性条件下(<6.8)变为黄色,而在碱性条件下(>8.2)变为粉红色。,酚红可以模拟雌激素,因此在培养表述雌激素受体的细胞种类时通常将其排除。不含酚红的培养基可以用以比色测定,例如MTT细胞增殖实验,苯酚的色谱图干扰分光光度法测量的读数,从而使结果纷乱。

四,血清

在许多培养系统中,最主要成分是血清,通常是胎牛血清FBS。血清来自血液,是糖,盐,脂质,生长因子等许多成分的混合物,由于其生物体来源因此,由于每批血清都带有杜伊乌尔,因此很难保持可再生性。为避免此疑问,一些实验室使用化学概念的血清替代品,而一些实验室购买了整批特定血清以保证结果一致。

5.代谢物,维生素和矿物质

DMEM的成分清单主要分成三类:氨基酸,维生素/辅因子和无机盐(包括钙和镁),这些成分中的许多在所有细胞培养基中都是常见的,并且其组合和浓度早已达到然而,许多实验室选择在培养基中添加额外的非必需氨基酸以以防细胞使用葡萄糖或谷氨酰胺展开合成。此外,一些公司还生产无镁和钙培养基用以特定研究,请选择时请精心检验。

六,抗生素

许多实验室在其细胞培养物中添加了抗生素,以防范危害细菌或真菌的生长。甚至无菌工作。chang也使用青霉素和链霉素(pen /strep)的组合,在完整的细胞培养基中,最后浓度是青霉素50-100IU/mL和链霉素50-100g/mL。但是,有些实验室选择不使用抗生素,因为它们会对细胞产生不好影响或掩饰少量细菌污染。根据您的需,您可以决定是不是在培养基中使用抗生素。